Богатата на водород среда регулира адхезията и пропускливосттаНаучно Изследване

Резюме:

Да се изследват регулаторните ефекти на богата на водород среда върху индуцирана от липополизахарид (LPS) адхезия на моноцити към ендотела на човешката пъпна вена клетки (HUVEC) и васкуларен ендотелен пермеабилитет in vitro. Ендотелните клетки се посяват в 6-ямкови плаки и произволно се разделят на 4 групи (n = 42 всяка): контрола (A), богата на водород среда (B), LPS (C) и LPS + богата на водород среда (D). Клетките се култивират в обикновена културална среда в групи A и C или в наситена с водород културална среда в групи B и D. LPS 1 µg/ml се добавя към групи C и D. При образуване на монослой моноцитите се добавят във всяка група след 6, 12 и 24 часа съответно. След 90-минутно съвместно култивиране статусът на адхезия беше открит чрез оцветяване на Wright-Giemsa. Супернатантите бяха събрани за откриване на концентрациите на васкуларна клетъчна адхезионна молекула-1 (VCAM-1) и E-селектин чрез ензимно-свързан имуносорбентен анализ (ELISA ). Експресията на VE-кадхерин се измерва чрез Western blot. Клетките се оцветяват с имунофлуоресценция, за да се покаже разпределението на VE-кадхерин след 24-часова инкубация. В сравнение с група А, адхезията на моноцитите към ендотелните клетки се повишава (P <0.05) в група C, нивата на E-селектин и VCAM-1 стават повишени (P <0.05), докато експресията на VE-кадхерин намалява значително (Р < 0.05). В сравнение с група C, адхезията намалява в група D (P <0,05), нивата на E-селектин и VCAM-1 намаляват (P <0,05), докато има повишена експресия на VE-кадхерин (P <0,05) . Три времеви точки показват същата тенденция. Резултатите от 24-часова флуоресценция показват, че в сравнение с група А, VE-кадхеринът е непълен във връзките клетка-клетка в група С. Въпреки това той е пълен и добре разпределен в група D спрямо група С. Богатата на водород среда може да намали LPS-индуцирано освобождаване на адхезионни молекули, намалява моноцитната адхезия към HUVEC и регулира експресията на VE-кадхерин за защита на съдовата пропускливост.