Богат на H2 физиологичен разтвор и микроРНК при чревна исхемия/реперфузияНаучно Изследване

Резюме:

Предистория Богатият на водород физиологичен разтвор (HRS) е доказано ефективен срещу исхемично реперфузионно (I/R) увреждане. Въпреки това, познанията за основните сигнални събития остават лоши. Имайки скорошно подчертаване на микроРНК (miRNA) при медииране на чревно I/R нараняване, ние предположихме, че HRS може да предпази червата от I/R нараняване чрез регулиране на miPHK. Метод На мишките се дава интраперитонеална инжекция с физиологичен разтвор или HRS веднъж дневно в продължение на 5 последователни дни преди да се подложат на чревна I/R, която се индуцира от 60-минутна исхемия, последвана от 180-минутна реперфузия на горна мезентериална артерия. Червата бяха събрани за хистопатологичен анализ, профилиране на miRNA микрочипове, PCR в реално време и Western blotting. След това мимиките или инхибиторите на miR-199a-3p бяха трансфектирани в IEC-6 клетки, за да се изследва връзката между лечението с HRS и miR-199a-3p. Резултати I/R-индуцираното увреждане на лигавицата и апоптозата на епителните клетки бяха отслабени чрез предварително третиране с HRS. Общо 64 чревни I/R-отзивчиви miRNAs бяха променени значително чрез HRS предварителна обработка, в която ние валидирахме 4 нови miRNAs с най-висока значимост чрез PCR в реално време, а именно miR-199a-3p, miR-296-5p, miR-5126 и miR-6538. По-специално, miR-199a-3p беше драстично увеличен от I/R, но намален от HRS. Изчислителният анализ прогнозира инсулиноподобен растежен фактор (IGF)-1, мишена на рапамицин (mTOR) при бозайници и регулаторна субединица 1 на фосфоинозитид-3-киназа (PI3K) като мишени на miR-199a-3p, което предполага участие на про-оцеляването път, IGF-1/PI3K/Akt/mTOR. В in vitro експеримент, лечението с HRS намалява нивото на miR-199a-3p, повишава експресията на IGF-1, PI3K и mTOR иРНК, възстановява жизнеспособността на IEC-6 клетките и тези защитни ефекти се обръщат при лечение, имитиращо miR-199a-3p. Заключение Взети заедно, miR-199a-3p може да играе ключова роля в антиапоптотичния механизъм на HRS, което допринася за неговата защита на червата срещу I/R нараняване.