H2 подобрява миогенната диференциация чрез p38 MAPK в стволови клеткиНаучно Изследване

Резюме:

Предистория и цели: Това проучване има за цел да изясни системите, които са в основата на регулирането и регулаторните роли на водорода, комбиниран с 5-Aza в миогенната диференциация на мастните мезенхимни стволови клетки (ADSCs). Методи и резултати: В това проучване ADSC действат като in vitro миогенен диференциращ режим. Първо, оцветяването Alamar blue и техниката за проследяване на митохондриите бяха използвани, за да се провери дали водородът, комбиниран с 5-Aza, може да стимулира клетъчната пролиферация. В допълнение, това проучване оценява миогенни диференциращи маркери (напр. Myogenin, Mhc и Myod протеинови експресии) въз основа на Western blotting анализ, анализ на клетъчни морфологични характеристики (напр. брой на Myotube, дължина, диаметър и индекс на зреене), RT-PCR ( Експресия на Myod, Myogenin и Mhc mRNA) и имунофлуоресцентен анализ (експресия на десмин, миозин и β-актин протеин). И накрая, за да проверим механизма на миогенна диференциация на свързаната с водород 5-Aza, направихме биоинформатичен анализ и Western blot, за да открием експресията на p-P38 протеин. Водородът, комбиниран с 5-Aza, значително повишава пролиферацията и миогенната диференциация на ADSC in vitro чрез увеличаване на броя на едноклетъчните митохондрии и регулиране на експресията на миогенни биомаркери като Myod, Mhc и образуване на миотуби. Експресиите на p-P38 се регулират нагоре от водород, комбиниран с 5-Aza. Способността за диференциране се потиска, когато клетките се култивират в комбинация с SB203580 (инхибитор на сигналния път на p38 MAPK). Заключения: Водородът облекчава цитотоксичността на 5-Aza и синергично насърчава капацитета за миогенна диференциация на мастните стволови клетки чрез p38 MAPK пътя. По този начин споменатите резултати представят представа за миогенната диференциация и е вероятно да генерират една потенциална алтернативна стратегия за заболявания, свързани със скелетните мускули. Ключови думи: 5-Азацитидин (5-Аза); Мезенхимни стволови клетки, получени от адипоза; водород; Миогенна диференциация; P38 MAPK сигнален път.