H2 потиска индуцираната от изопротеренол аутофагия в кардиомиоцититеНаучно Изследване

Резюме:

Предишно проучване от нашата група показа, че прилагането на водород може да намали сърдечносъдовата хипертрофия in vivo чрез насочване към зависимите от реактивните кислородни видове митоген-активирана протеин киназна сигнализация. Целта на настоящото изследване е да се определи ефектът на водорода върху кардиомиоцитната аутофагия по време на β-адренорецепторно активиране in vivo и in vitro. Приготвихме богата на водород среда и концентрацията на водород беше измерена с помощта на метода на реагента MB-Pt. За изследването in vitro, H9c2 кардиомиоцитите бяха стимулирани с изопротеренол (ISO; 10 µM) за 5, 15 и 30 минути, след което бяха определени нивата на експресия на протеина на леката верига 3β II (LC3B II), асоцииран с микротубулния маркер за автофагия. изследвани чрез Western blotting. След това ефектът от богатата на водород среда беше тестван чрез предварително третиране на H9c2 кардиомиоцитите с богата на водород среда за 30 минути, след това стимулиране с ISO и изследване на нивата на експресия на протеин на маркера за автофагия LC3B II. За изследването in vivo мишките получават водород (1 ml/100 g/ден, чрез интраперитонеална инжекция) в продължение на 7 дни преди прилагане на ISO (0,5 mg/100 g/ден, чрез подкожна инжекция) и впоследствие получават водород със или без ISO за още 7 дни. Хипертрофичните отговори бяха изследвани чрез измерване на сърдечно тегло (HW) и сърдечно тегло/телесно тегло (HW/BW). Беше изследвана протеиновата експресия на маркери за аутофагия Beclin1, свързан с аутофагия протеин 7 (Atg7) и LC3B II. Резултатите показват, че прекомерната аутофагия е настъпила след 5 минути ISO стимулация in vitro. Тази засилена аутофагия беше блокирана чрез предварителна обработка с богата на водород среда. Освен това, водородът подобрява влошените хипертрофични реакции и инхибира повишената автофагична активност, медиирана от прилагането на ISO in vivo, както е показано чрез намаляване на HW и HW/BW и потискане на нивата на експресия на протеини на Beclin1, Atg7 и LC3B II. Следователно резултатите от настоящото проучване показват, че водородът инхибира ISO-индуцираната прекомерна аутофагия в модели на кардиомиоцитна хипертрофия in vitro и in vivo.