Влияние на H2 и субероиланилид хидроксамова киселина върху ROS и TNF-α, индуцирани от паракват в макрофагиНаучно Изследване

Резюме:

Целта на това изследване е да се изследват ефектите на молекулярния водород (H2) и субероиланилид хидроксамова киселина (SAHA), инхибитор на хистон деацетилаза върху паракват (PQ)-стимулирано производство на реактивни кислородни видове (ROS) и фактор на туморна некроза алфа (TNF-α) в макрофагите. Първо, оптималната концентрация на PQ беше определена в макрофаг RAW264.7 чрез третиране на клетки, лишени от серум, с PQ при 0, 0.001, 0.01, 0.1, 1 и 10 mM. Оценихме на 1, 2 и 8 часа (1) клетъчната жизнеспособност (чрез метода за изключване на трипаново синьо), (2) вътреклетъчните нива на ROS (с флуоресцентна DCFH-DA сонда) и (3) нивото на TNF-α в хранителна среда (определена чрез ензимно-свързан имуносорбентен анализ, ELISA). Впоследствие, миши RAW267.4 макрофаги бяха третирани с PQ в комбинация със SAHA и/или H2 в продължение на 8 часа. PQ проявява значителен стимулиращ, но нетоксичен ефект върху макрофагите RAW267.4 при 0,1 тМ. Тази концентрация на PQ беше използвана в следващите експерименти. H2 и H2, комбинирани със SAHA, предизвикват по-голямо намаляване на PQ-индуцираното производство на ROS, отколкото само SAHA, особено на 2 и 8 часа. На 1 и 2 h леченията, включващи H2, причиняват по-голямо намаляване на PQ-индуцираното производство на TNF-α, отколкото съответните лечения без H2. Въпреки това, след 8 часа, лечението със SAHA предизвиква по-изразени ефекти върху TNF-α, отколкото лечението без SAHA. H2 намалява PQ-индуцираното производство на ROS и отслабва ранното PQ-индуцирано производство на TNF-α, докато SAHA намалява късната фаза на PQ-индуцираното производство на TNF-α в макрофагите. Ефектите се засилват от комбинацията на H2 и SAHA.