Богата на H2 вода и CD34 експресия при TBI плъховеНаучно Изследване

Резюме:

Цел: Да се наблюдава ефектът от богата на водород вода върху експресията на CD34 и ангиогенезата в мозъчната тъкан на лезията на плъхове с травматично мозъчно увреждане (TBI).

Методи: Общо 54 възрастни мъжки плъхове Sprague-Dawley (SD) бяха разделени на три групи по таблица с произволни числа: а именно група с фиктивна операция (група с фиктивна операция), група с травма (група с TBI ), и травма + богата на водород вода група (TBI+HW група), плъховете във всяка група бяха подразделени на 1, 3 и 7 дни подгрупи според времевите точки след травмата, с 6 плъха във всяка подгрупа. Моделът TBI беше възпроизведен чрез използване на модифициран метод на Feency за удар на свободно падане и плъховете във фиктивната група не получиха мозъчно въздействие след краниотомия. На плъховете в групата TBI+HW беше дадена интраперитонеална инжекция с богата на водород вода (5 mL/kg) след възпроизвеждане на модела на TBI и след това веднъж на ден, докато не бъдат умъртвени, а на плъховете в групата с фалшива и TBI групата беше дадено същото количество нормален физиологичен разтвор. Резултатите за неврологична тежест (NSS) за неврологични дефицити се изчисляват в съответните времеви точки и след това плъховете се умъртвяват за мозъчна тъкан на 3 mm около границата на лезията. След оцветяване с хематоксилин-еозин (HE), патологичните промени в граничната мозъчна тъкан на лезията се наблюдават под светлинен микроскоп. Експресията на CD34+ клетки се наблюдава чрез имунохистохимичен анализ, който маркери се използват за преброяване на новородените кръвни капилярни кълнове около травматичната мозъчна тъкан. Протеиновата експресия на CD34 се определя чрез Western Blot.

Резултати: Резултатите от NSS във всички времеви точки във фиктивната група бяха 0. Резултатите от NSS в групите TBI и TBI+HW показват намалена тенденция с удължаване на времето след TBI, което показва повече значими в групата TBI+HW, NSS резултатите на 3 дни и 7 дни са значително по-ниски от тези на групата TBI (3 дни: 8,67±0,52 спрямо 11,56±1,94, 7 дни: 7,33±0,52 спрямо 8,17±0,98, и двете P <0,05). Под светлинен микроскоп мозъчната тъкан на плъхове във фиктивната група е нормална. След нараняване, патологичните промени в мозъчната тъкан на границата на лезията в групата на TBI се характеризират с очевидна хеморагична некроза, тежък мозъчен оток, голям брой дегенерации и некрози на нервните клетки и възпалителна клетъчна инфилтрация, а патологичните промени са по-очевидни на 3 дни. Площта на отока в групата TBI+HW беше малко по-малка от тази на групата TBI и околният оток беше леко намален. Чрез имунохистохимия беше показано, че само много малък брой неоформиращи капиляри са открити във фиктивната група. Броят на неоформативните капиляри в граничната мозъчна тъкан на лезията постепенно се увеличава с удължаване на времето в групата на TBI. Броят на неоформативните капиляри в групата TBI+HW е по-значим, което е значително по-високо от това на групата TBI на 3 дни и 7 дни след нараняването (клетки/HP: 10,59±1,88 спрямо 8,61±1,22 на 3 дни, 23,20± 3,16 спрямо 17,01±2,64 на 7 дни, и двете P < 0,05). Чрез Western Blot беше показано, че експресията на CD34 протеин във всички времеви точки в TBI групата е значително увеличена в сравнение с тази на фиктивната група. Експресията на CD34 протеин на 1 ден и 3 дни в групата TBI+HW беше леко повишена в сравнение с тази на групата TBI без значителна разлика, но беше значително повишена на 7 дни след нараняване, което беше значително по-високо от това на TBI група (сива стойност: 1,36±0,36 спрямо 0,74±0,08, Р <0,05). Заключения: Водата, богата на водород, насърчава CD34+ клетките да се прибират към мястото на увредена тъкан при плъхове с TBI, участва в ангиогенезата и подобрява клиничните резултати по време на мозъчното функционално възстановяване.