H2 защитава невроните на хипокампа от хипоксия/реоксигенацияНаучно Изследване

Резюме:

Дълбоко хипотермично спиране на кръвообращението (DHCA) е техника за церебрална защита, която се използва при операции, включващи аортната дъга и мозъчна аневризма в продължение на десетилетия. По-рано показахме, че третирани с DHCA плъхове са развили значителен оксидативен стрес и апоптоза в невроните. Тук възнамеряваме да изследваме защитния ефект на водорода срещу клетъчно увреждане, предизвикано от окислителен стрес, и включените механизми, използвайки in vitro експериментален модел на хипоксия/реоксигенация (H/R) върху HT-22 клетки. Моделът на H/R беше създаден с помощта на херметически затворен контейнер за култура и анаеропакет. Измерването на потенциала на митохондриалната мембрана (MMP) и производството на реактивни кислородни видове (ROS) беше използвано H2DCFDA и JC-1 оцветяване. Western blot беше използван за количествено определяне на Akt, p-Akt, Bcl-2, Bax и разцепени каспаза-3 протеини. Профилът на микроРНК (miRNA) в неврони на хипокампа от плъши модел на DHCA се определя чрез дълбоко секвениране на miRNA. Повишаването на ROS и намаляването на ММР са значително индуцирани от лечението с хипоксия за 18 часа, последвано от реоксигенация за 6 часа. Лечението с водород значително намалява клетъчната смърт, причинена от H/R. Нивата на p-Akt (Ser 473) и Bcl-2 бяха значително повишени, докато Bax и разцепената каспаза-3 бяха намалени чрез третиране с водород по модела на H/R. Експресията на семейството miR-200 беше значително повишена в модела на DHCA и H/R. Прилагането на водород инхибира H/R-индуцираната експресия на семейството miR-200 в НТ-22 клетки. В допълнение, инхибирането на семейството miR-200 потиска H/R-причинената клетъчна смърт чрез намаляване на производството на ROS. Тези резултати предполагат, че H/R причинява индуцирана от оксидативен стрес клетъчна смърт и че водородът предпазва от H/R-индуцирана клетъчна смърт в HT22 клетки, отчасти поради намаляване на експресията на семейството miR-200. © 2015 S. Karger AG, Базел.