Водородът облекчава страничните действия на лекарствата при рак на белия дробНаучно Изследване

оригинално заглавие (букв. прев.): Водородната терапия може да се използва за контролиране на туморната прогресия и облекчаване на нежеланите събития от лекарства при пациенти с напреднал недребноклетъчен рак на белия дроб

Published: 2020 Year

Абстракт

Срещу напреднал недребноклетъчен рак на белия дроб се използват химиотерапия, таргетна терапия и имунотерапия. Липсва клинично ефикасен метод за облекчаване на нежеланите събития, свързани с такива терапии. Петдесет и осем възрастни пациенти бяха включени в нашето проучване за облекчаване на белодробни симптоми или нежелани реакции от лекарства. Двадесет пациенти, които отказаха лечение с лекарства, бяха разпределени еднакво и на случаен принцип в група само с водород (H ₂ ) и контролна група. Според резултатите от тумор-генни мутации и изследвания медикамент чувствителност, 10, 18, и 10 пациента бяха включени в химиотерапия, насочена терапия, имунотерапия и групи, в които тези терапии се смесват с Н ₂ -therapy, съответно.

Пациентите, подложени на Н ₂вдишване за 4-5 часа на ден в продължение на 5 месеца или спиране при рецидив на рак. Преди започване на проучването, демографските данни (с изключение на гените на туморна мутация) и белодробните симптоми (с изключение на умерена кашлица) на петте групи не показват значителна разлика. През първите 5 месеца от лечението разпространението на симптомите на контролната група се увеличава постепенно, докато това на четирите лекувани групи намалява постепенно. След 16 месеца проследяване преживяемостта без прогресия на контролната група е по-ниска от тази на групата само с H ₂ и значително по-ниска от тази на H ₂ + химиотерапия, H ₂ + таргетна терапия и H ₂+ имунотерапевтични групи. В групите с комбинирана терапия повечето свързани с лекарството нежелани събития намаляват постепенно или дори изчезват. За първи път в клиниката е открита инхалация на H _2, която може да се използва за контролиране на туморната прогресия и облекчаване на нежеланите събития от лекарства за пациенти с напреднал недребноклетъчен рак на белия дроб.

Заключение

Установно е, че монотерапията с H₂ може да удължи PFS на пациенти с напреднал NSCLC от 4,4 ± 1,2 месеца до 7,9 ± 2,2 месеца, което предполага, че H₂ може независимо да инхибира растежа на ракови клетки на белия дроб. Тази хипотеза е подкрепена от данни от проучване in vitro и in vivo , което потвърждава, че H₂ може да инхибира пролиферацията, миграцията и инвазията на клетъчните линии на рак на белия дроб и туморния растеж в миши модел. ^[53] Тези данни предполагат, че H₂ може да служи като нова терапия срещу рак на белия дроб. Въпреки това, за пациенти, отговарящи на условията за лечение от първа линия, лекарствата ще предизвикат по-изразени ефекти върху контрола на тумора. Дали комбинация от лекарствена терапия и Н ₂ терапия може да предизвика по-добър контрол на тумора трябва да се изследва по-нататък, но постепенно намаляване на повечето лекарствени свързани нежелани събития след Н ₂вдишването е ясно.

Оригинална Публикация

Водородната терапия може да се използва за контролиране на туморната прогресия и облекчаване на нежеланите събития от лекарства при пациенти с напреднал недребноклетъчен рак на белия дроб

DOI:  10.4103/2045-9912.285560

Дата на уеб публикация

05 юни 2020 г

 

Срещу напреднал недребноклетъчен рак на белия дроб се използват химиотерапия, таргетна терапия и имунотерапия. Липсва клинично ефикасен метод за облекчаване на нежеланите събития, свързани с такива терапии. Петдесет и осем възрастни пациенти бяха включени в нашето проучване за облекчаване на белодробни симптоми или нежелани реакции от лекарства. Двадесет пациенти, които отказаха лечение с лекарства, бяха разпределени еднакво и на случаен принцип в група само с водород (H ₂ ) и контролна група. Според резултатите от тумор-генни мутации и изследвания медикамент чувствителност, 10, 18, и 10 пациента бяха включени в химиотерапия, насочена терапия, имунотерапия и групи, в които тези терапии се смесват с Н ₂ -therapy, съответно. Пациентите, подложени на Н ₂вдишване за 4-5 часа на ден в продължение на 5 месеца или спиране при рецидив на рак. Преди започване на проучването, демографските данни (с изключение на гените на туморна мутация) и белодробните симптоми (с изключение на умерена кашлица) на петте групи не показват значителна разлика. През първите 5 месеца от лечението разпространението на симптомите на контролната група се увеличава постепенно, докато това на четирите лекувани групи намалява постепенно. След 16 месеца проследяване преживяемостта без прогресия на контролната група е по-ниска от тази на групата само с H ₂ и значително по-ниска от тази на H ₂ + химиотерапия, H ₂ + таргетна терапия и H ₂+ имунотерапевтични групи. В групите с комбинирана терапия повечето свързани с лекарството нежелани събития намаляват постепенно или дори изчезват. За първи път в клиниката е открита инхалация на H _2, която може да се използва за контролиране на туморната прогресия и облекчаване на нежеланите събития от лекарства за пациенти с напреднал недребноклетъчен рак на белия дроб.

Критериите за включване и изключване

Това клинично изпитване е регистрирано в ClinicalTrials.gov (идентификатор: NCT03818347) на 28 януари 2019 г. Записаните пациенти бяха разделени на пет групи според точните резултати от медицински тестове за тумори. Критериите за включване са пациенти със: стадий III или -IV NSCLC, диагностициран чрез образна диагностика и патология при лекар специалист; тумор номер 1-6; максимална дължина на тумора < 2 cm; Резултат за състоянието на Карнофски (KPS) ≥ 70; очаквано време на преживяемост > 6 месеца; брой на тромбоцитите ≥ 80 × 10 ^[9] /L; брой бели кръвни клетки ≥ 3 × 10 ^[9] /L; брой неутрофили ≥ 2 × 10 ^[9]/L; хемоглобин ≥ 80 g/L. Критериите за изключване са пациенти със: сърдечен пейсмейкър; метастази в мозъка; хипертония степен 3 или диабетни усложнения; тежка сърдечна и белодробна дисфункция. Този протокол от проучването получи етично одобрение от Комитета по етика на ракова болница Фуда на университета в Джинан на 7 декември 2018 г. (одобрение № Fuda20181207). От всеки пациент е получено писмено информирано съгласие.

Субекти

Между юни и септември 2019 г. 58 пациенти с напреднал НДКРБ в онкологичната болница Фуда на университета Джинан отговарят на критериите за включване, споменати по-горе и са включени в проучването. Тридесет и четири пациенти са имали операция преди записването, а 24 пациенти са били в напреднал стадий при поставяне на диагнозата.

Предприети са имунохистохимични анализи на съотношението на програмирана клетъчна смърт-1: програмирана клетъчна смърт-1 лиганди, тежест на туморни мутации и микросателитна нестабилност в туморни проби. Въз основа на резултатите, 10 пациенти са прилагани лекарство на базата на антитела срещу програмирана клетъчна смърт-1 (Nivolumab [Opdivo ^® , Bristol-Myers Squibb, Ню Йорк, NY, САЩ] или Pembrolizumab [Keytruda ^® , Merck, Kennyworth, Ню Джърси, САЩ]). Чрез откриване на генни мутации в туморни проби бяха избрани 18 пациенти, които да получат таргетна терапия. Пациенти с мутация в гена на епидермален растежен фактор рецептор бяха приложени Osimertinib (Tagrisso ^® , AstraZeneca, London, UK), гефитиниб (Iressa ^® , AstraZeneca) или ерлотиниб (Tarceva ^®, Рош, Базел, Швейцария). Пациенти с мутация в гена на анапластична лимфома киназа или рецепторна тирозин киназа-1 гена са прилагани Crizotinib (Xalkori ^® , Pfizer, New York, NY, USA). Въз основа на данните от тестове за чувствителност към лекарства, на 10 пациенти е приложена химиотерапия (Cisplatin или Carboplatin [и двата от Qilu Pharmaceutical, Хайкоу, провинция Хайнан, Китай]).

Останалите 20 пациенти, които не са чувствителни към общи лекарства или които не се повлияват от лечението с общи лекарства се разпределя равномерно в Н ₂ -monotherapy група или контролната група. Три групи от пациенти, които са имали H ₂лечение, комбинирано с друго лечение (имунотерапия, таргетна терапия или химиотерапия), е започнало терапия преди записването на нашето клинично изпитване. Повечето от тези пациенти са имали значителни ефекти върху свързаните с рак белодробни симптоми след приемане на комбинирана терапия, но се появяват нови нежелани събития, свързани с лекарства. Белодробни симптоми или нежелани лекарствени реакции бяха сравнени преди и след Н ₂ лечение. Сравнението на белодробните симптоми преди лечение с водород и промените в туморните или свързаните с лекарството симптоми във всяка група след лечение с водород е показано на [Фигура 1] . Това проучване следва изявлението за прозрачно отчитане на оценки с нерандомизирани проекти (TREND).

Фигура 1: Сравнение на симптомите на пациенти във всяка група преди и след лечение с водород. Забележка: Химиотерапия: Химиотерапия; Н 2 : водород; Имуно: имунотерапия; NSCLC: недребноклетъчен рак на белия дроб; Цел: насочена терапия.Щракнете тук, за да видите

Н ₂ инхалация

H ₂ е произведено от Н ₂ -oxygen пулверизатор (H ₂ 66,7% и 33,3% кислород; максимален дебит газ, 3 L / минута; AMS-Н-03, Shanghai Асклепий Meditec, Shanghai, Китай). Контролната група е подложена на фалшива процедура (H ₂ 0% и кислород 33,3%; максимален газов поток 3 L/min; Shanghai Asclepius Meditec). Включените пациенти вдишват газовата смес в продължение на 4-6 часа всеки ден и се подлагат на образно изследване всеки месец, докато съществуващите лезии прогресират значително или се появят нови метастази. PFS се изчислява от началото на Н ₂вдишване до прогресия на тумора. Всички пациенти са получавали компютърна томография или магнитен резонанс всеки месец. Ако съществуващите тумори нараснат значително или се появят нови метастази, това се счита за прогресия на тумора.

Белодробни симптоми и лекарство-свързани нежелани събития

на дихателната функция на приети пациенти преди H ₂ терапия се оценява чрез много опитни респираторни лекари с помощта на белодробната функция тестер (Autospiro AS-507; Minato Medical Science, Токио, Япония). Белодробна тумор-свързани симптоми и КПС резултат от всички пациенти преди H ₂се оценяват вдишването. Нежеланите събития от химиотерапия, таргетна терапия или имунотерапия са оценени от същите респираторни лекари съгласно Общите терминологични критерии за нежелани събития 5.0.

Статистически анализи

Преди лечението с H ₂ , демографските и свързаните с тумора симптоми на пациентите бяха сравнени с помощта на хи-квадрат и точните тестове на Fisher; дихателната функция и KPS резултатът бяха сравнени с помощта на еднопосочен анализ на дисперсията и теста за множествено сравнение на Bonferroni. След Н ₂ лечение, всеки тумор-асоцииран симптом и лекарство-свързани нежелани събития се сравнява с помощта на линеен регресионен анализ; PFS на всяка група се сравнява чрез еднопосочен анализ на дисперсията и теста за множествено сравнение на Bonferroni. П< 0,05 се счита за значима разлика. Анализите бяха направени с помощта на Prism 5.0 (GraphPad, Сан Диего, Калифорния, САЩ).

РЕЗУЛТАТИ

Клинични данни за пациенти с напреднал недребноклетъчен рак на белия дроб с лечение с H ₂ инхалатор.

Пациентите са били подложени на инхалация на H ₂ на ден в продължение на 5 месеца или са спрели инхалацията при рецидив на рака. Няма значителна разлика в характеристиките на повечето пациенти (напр. пол) във всяка група. Въпреки това, насочена терапия-H ₂ -therapy група има по-висок процент на тумор-генни мутации от другите четири групи ( Р = 0.005; [Таблица 1] .

Таблица 1: Демография на пациенти с напреднал недребноклетъчен рак на белия дроб в различни групи Щракнете тук, за да видите

Белодробни признаци и симптоми на пациенти с напреднал недребноклетъчен рак на белия дроб с инхалационно лечение с H ₂

Преди началото на терапията с H ₂ не е имало значима разлика в белодробната функция или в KPS резултата сред петте групи пациенти [Таблица 2] . Разпространението на повечето белодробни симптоми (напр. лека диспнея, не-сърдечна гръдна болка, плеврален излив и хемоптиза) е сходно сред групите. Разпространението на повечето белодробни симптоми в контролната група, H ₂ -monotherapy група и имунотерапия-H ₂ -therapy група е по-висока от тази, в целевата терапия-H ₂ -therapy група и химиотерапия Н ₂ -therapy група ( Р = 0,0137).

Таблица 2: Белодробни признаци и симптоми преди водородна терапия на пациенти с напреднал недребноклетъчен рак на белия дроб с инхалационно лечение с H 2 Щракнете тук, за да видите

Свързани с тумора симптоми при пациенти с напреднал недребноклетъчен рак на белия дроб с инхалаторно лечение с H ₂

В началото на лечението с H ₂ разпространението на симптомите, свързани с тумора в контролната група и групата с H ₂ -монотерапия, е сходно ( P = 0,9994) . С удължаване на времето за лечение в контролната група разпространението на умерена кашлица ( P = 0,0023), лека диспнея ( P = 0,0019), лека несърдечна гръдна болка ( P = 0,0006), лек плеврален излив ( P = 0,0023 ), а леката хемоптиза ( P = 0,0028) се увеличава значително [Фигура 2] A. В H ₂– група за монотерапия, разпространението на умерена кашлица ( P = 0,0014), лека диспнея ( P = 0, 0247), лека несърдечна болка в гърдите ( P = 0, 0136), лек плеврален излив ( P = 0, 0015) и лека хемоптиза ( P = 0,0048) намалява значително [Фигура 2] B.

Фигура 2: Симптомите, свързани с тумора, варират в зависимост от времето за вдишване на водород (H 2 ). Забележка: (A) Контролна група (вдишване на 33,3% кислород газ и не H 2 ( п = 10) (В) Н. 2 само група (вдишване на 66,7% Н 2 + 33,3% О 2 ) ( п = 10). Всеки симптом, свързан с тумора, беше сравнен чрез линеен регресионен анализ.Щракнете тук, за да видите

Свързани с лекарства нежелани реакции при пациенти с напреднал недребноклетъчен рак на белия дроб с инхалаторно лечение с H ₂

В началото на лечението с H ₂ разпространението на тумор-свързаните симптоми в трите групи е сходно ( P = 0,5120), но свързано с лекарството симптомите в трите групи са доста различни [Фигура 3] . С удължаването на времето на лечение разпространението на кашлица и не-сърдечна болка в гърдите ( P = 0,0013), макулопапулозен обрив ( P = 0, 0021), чернодробно-билиарно заболяване ( P = 0, 0064) и световъртеж и главоболие ( P = 0, 0111) намалява значително с удължаване на времето за лечение. , но диарията не ( P = 0,4144)[Фигура 3] А. В целевата терапия-H ₂ -therapy групата, разпространението фебрилна гранулоцитопения ( Р = 0.0026), гадене и повръщане ( Р = 0.0051), макулопапуларен обрив ( Р <0.0001), безсъние ( Р = 0.0144) , и оралният мукозит ( P = 0,0007) намалява значително [Фигура 3] B. В групата на химиотерапия-H ₂ -терапия, разпространението на фебрилна гранулоцитопения ( P = 0,0086), анемия и тромбоцитопения ( P = 0,0009 и диарея ), запек ( P = 0,0053) и анорексия ( P= 0,0129) намалява значително, но гаденето и повръщането не ( P = 0,0720; [Фигура 3] C.

Фигура 3: Симптомите, свързани с лекарството, варират в зависимост от времето за вдишване на водорода (H 2 ). Забележка: (A) Имунотерапия-H 2 група ( п = 10). (В) Целева-H 2 терапия група ( п = 18). (С) Химиотерапията-H 2 терапия група ( п = 10). Свързаното с лекарството нежелано събитие беше сравнено с помощта на линеен регресионен анализ.Щракнете тук, за да видите

PFS на пациенти с напреднал недребноклетъчен рак на белия дроб с инхалационно лечение с H ₂

След 16 месеца проследяване, всички 58 пациенти развиват туморна прогресия. PFS за контролната група беше 4.4 ± 1.2 месеца, докато тази за Н ₂ -само група беше 7.9 ± 2.2 месеца, Н ₂ -immunotherapy група е 10.1 ± 2.6 месеца, Н ₂ прицелна терапия група беше 9.4 ± 3.1 месеца, и Н ₂ -chemotherapy група беше 8.5 ± 3.0 месеца. PFS на четири групи на лечение е по-дълъг от този на контролната група, и че от трите Н ₂ терапия комбинирани групи е удължено значително [Фигура 4] .

Фигура 4: Сравнение на преживяемостта без прогресия (PFS) между групи след третиране с водород (H 2 ). Забележка: PFS на всяка група беше сравнена чрез еднопосочен анализ на дисперсията и теста за множествено сравнение на Bonferroni. * P < 0,05, ** P < 0,01, *** P < 0,001.Щракнете тук, за да видите

 

Дискусия

Молекулярният H ₂ е използван за лечение на белодробни симптоми при животински модели на остро белодробно увреждане, ^{[18] , [19] , [20] , [21]} астма ^[22] и хронична обструктивна белодробна болест. ^{[23] , [24] , [25]} Принципът на Н ₂ терапия включва инхибиране на секрецията на цитокини, такива като интерлевкин-4, интерлевкин-13, ^[22] интерлевкин-6 и тумор некрозис фактор-α. ^[15] Н ₂ терапия може да облекчи белодробно възпаление без нарушаване на анти-туморни ефекти. ^{[14] , [26]} Следователно, Х₂ газ може да се приеме като адювантна терапия за потискане на тези симптоми.

Химиотерапията, таргетната терапия и имунотерапията са лечение от първа линия срещу напреднал NSCLC. ^{[27] , [28] , [29]} Смята се, че значително увеличеното генериране на реактивни кислородни видове по време на лечението допринася за нежелани събития, водещи до оксидативен стрес, възпаление и апоптоза. ^{[30] , [31]} В настоящото проучване, Н ₂ терапия беше показан за облекчаване на свързани с лекарството странични ефекти, повечето от които са докладвани в животински модели, включително увреждане на белите дробове, причинени от различни фактори, ^{[18] , [19] , [20] , [21]}чернодробно-билиарни заболявания, ^{[32] , [33] , [34]} макулопапулозен обрив, ^[35] диария и запек, ^{[36] , [37] , [38]} гадене и повръщане, ^{[39] , [40]} орален мукозит, ^{[ 41] , [42]} анемия, ^[43] тромбоцитопения, ^[44] и анорексия. ^[45] Открихме, че разпространението на безсъние, виене на свят и главоболие може да бъде намалено значително след вдишване на H ₂ , което може да бъде свързано с облекчаване на заболявания на централната нервна система, като мозъчен кръвоизлив, ^{[46], [47] , [48]} Болестта на Паркинсон ^{[49] , [50]} и болестта на Алцхаймер, ^{[51] , [52]} наблюдавани при експерименти с животни. Механизмът на действие, наблюдаван при експерименти с животни, може да се използва като референция за клинични изследвания. Изненадващо, Н ₂ терапия, която не е токсичен и може да облекчи нежелани събития в множество органи едновременно, се използва рядко.

Установихме, че монотерапията с H₂ може да удължи PFS на пациенти с напреднал NSCLC от 4,4 ± 1,2 месеца до 7,9 ± 2,2 месеца, което предполага, че H₂ може независимо да инхибира растежа на ракови клетки на белия дроб. Тази хипотеза е подкрепена от данни от проучване in vitro и in vivo , което потвърждава, че H₂ може да инхибира пролиферацията, миграцията и инвазията на клетъчните линии на рак на белия дроб и туморния растеж в миши модел. ^[53] Тези данни предполагат, че H₂ може да служи като нова терапия срещу рак на белия дроб. Въпреки това, за пациенти, отговарящи на условията за лечение от първа линия, лекарствата ще предизвикат по-изразени ефекти върху контрола на тумора. Дали комбинация от лекарствена терапия и Н ₂ терапия може да предизвика по-добър контрол на тумора трябва да се изследва по-нататък, но постепенно намаляване на повечето лекарствени свързани нежелани събития след Н ₂вдишването е ясно.

Няколко метода за доставка на молекулярната Н ₂ са достъпни и удобни: вдишване, питейна Н ₂ -dissolved вода, инжекция с Н ₂ -наситен физиологичен разтвор, и вземане на “H ₂ баня.” ^[54] H ₂ е нетоксичен, евтин, може да се прилага лесно, може да дифундира в тъкани и клетки ^[55] и преминава през кръвно-мозъчната бариера. ^[56] Следователно H ₂ може да се използва за лечение на тумори на главата, шията и гръдния кош. Поради риска от експлозия на Н ₂и кислород се смесва с въздух, често тези газови смеси се вдишват използване катетри и маски, докато, при опити с животни, пиене или инжектиране на Н ₂ -dissolved вода се използва. Използването на машина с достатъчно висока скорост на потока (3 L/min) и продължителност на вдишване всеки ден (4-6 часа) на H ₂ в това проучване може да позволи контрол на туморния растеж и да намали разпространението на нежеланите събития от лекарства.

Като цяло, H₂за първи път в клиниката е открита инхалация, която може да се използва за контролиране на туморната прогресия и облекчаване на нежеланите събития от лекарства при пациенти с напреднал NSCLC. Основното ограничение на това проучване е, че броят на записаните пациенти е сравнително малък и по-точните ползи за пациентите все още очакват резултатите от големи проби. Дали тази терапевтичен ефект може да бъде допълнително подобрена, както и определяне на синергичния ефект на лекарства и Н ₂ терапия, трябва да бъдат изследвани по-нататък.

1.	Siegel RL, Miller KD, Jemal A. Cancer statistics, 2019. CA Cancer J Clin. 2019;69:7-34
2.	Reinke LF, Feemster LC, Backhus LM, Gylys-Colwell I, Au DH. Assessment and management of symptoms for outpatients newly diagnosed with lung cancer. Am J Hosp Palliat Care. 2016;33:178-183
3.	de Groot PM, Chung JH, Ackman JB, et al. ACR Appropriateness Criteria® noninvasive clinical staging of primary lung cancer. J Am Coll Radiol. 2019;16:S184-S195
4.	Rossi A, Di Maio M. Platinum-based chemotherapy in advanced non-small-cell lung cancer: optimal number of treatment cycles. Expert Rev Anticancer Ther. 2016;16:653-660
5.	Kumarakulasinghe NB, van Zanwijk N, Soo RA. Molecular targeted therapy in the treatment of advanced stage non-small cell lung cancer (NSCLC). Respirology. 2015;20:370-378
6.	Perrotta F, Rocco D, Vitiello F, et al. Immune checkpoint blockade for advanced NSCLC: a new landscape for elderly patients. Int J Mol Sci. 2019;20:2258
7.	Zhou JG, Tian X, Cheng L, et al. The risk of neutropenia and leukopenia in advanced non-small cell lung cancer patients treated with Erlotinib: a prisma-compliant systematic review and meta-analysis. Medicine. 2015;94:e1719
8.	Wang Z, Cai XJ, Chen LY, et al. Factors potentially associated with gemcitabine-based chemotherapy-induced thrombocytopenia in Chinese patients with nonsmall cell lung cancer. J Cancer Res Ther. 2018;14:S656-S660
9.	Li J, Yuan Z, Wang Q, Fan W, Zhang G. Meta-analysis of overall incidence and risk of ALK inhibitors-induced liver toxicities in advanced non-small-cell lung cancer. Medicine (Baltimore). 2019;98:e13726
10.	Kelso GF, Porteous CM, Coulter CV, et al. Selective targeting of a redox-active ubiquinone to mitochondria within cells: antioxidant and antiapoptotic properties. J Biol Chem. 2001;276:4588-4596
11.	Ferrer MD, Sureda A, Tauler P, Palacín C, Tur JA, Pons A. Impaired lymphocyte mitochondrial antioxidant defences in variegate porphyria are accompanied by more inducible reactive oxygen species production and DNA damage. Br J Haematol. 2010;149:759-767
12.	Ohta S. Molecular hydrogen as a novel antioxidant: overview of the advantages of hydrogen for medical applications. Methods Enzymol. 2015;555:289-317
13.	Matsushita T, Kusakabe Y, Kitamura A, Okada S, Murase K. Investigation of protective effect of hydrogen-rich water against cisplatin-induced nephrotoxicity in rats using blood oxygenation level-dependent magnetic resonance imaging. Jpn J Radiol. 2011;29:503-512
14.	Meng X, Chen H, Wang G, Yu Y, Xie K. Hydrogen-rich saline attenuates chemotherapy-induced ovarian injury via regulation of oxidative stress. Exp Ther Med. 2015;10:2277-2282
15.	Terasaki Y, Suzuki T, Tonaki K, et al. Molecular hydrogen attenuates gefitinib-induced exacerbation of naphthalene-evoked acute lung injury through a reduction in oxidative stress and inflammation. Lab Invest. 2019;99:793-806
16.	Ono H, Nishijima Y, Ohta S, et al. Hydrogen gas inhalation treatment in acute cerebral infarction: a randomized controlled clinical study on safety and neuroprotection. J Stroke Cerebrovasc Dis. 2017;26:2587-2594
17.	Asanuma H, Kitakaze M. Translational study of hydrogen gas inhalation as adjuncts to reperfusion therapy for acute myocardial infarction. Circ J. 2017;81:936-937
18.	Zhai Y, Zhou X, Dai Q, Fan Y, Huang X. Hydrogen-rich saline ameliorates lung injury associated with cecal ligation and puncture-induced sepsis in rats. Exp Mol Pathol. 2015;98:268-276
19.	Sun Q, Cai J, Liu S, et al. Hydrogen-rich saline provides protection against hyperoxic lung injury. J Surg Res. 2011;165:e43-49
20.	Liu S, Liu K, Sun Q, et al. Consumption of hydrogen water reduces paraquat-induced acute lung injury in rats. J Biomed Biotechnol. 2011;2011:305086
21.	Fang Y, Fu XJ, Gu C, et al. Hydrogen-rich saline protects against acute lung injury induced by extensive burn in rat model. J Burn Care Res. 2011;32:e82-e91
22.	Xiao M, Zhu T, Wang T, Wen FQ. Hydrogen-rich saline reduces airway remodeling via inactivation of NF-κB in a murine model of asthma. Eur Rev Med Pharmacol Sci. 2013;17:1033-1043
23.	Liu Z, Geng W, Jiang C, et al. Hydrogen-rich saline inhibits tobacco smoke-induced chronic obstructive pulmonary disease by alleviating airway inflammation and mucus hypersecretion in rats. Exp Biol Med (Maywood). 2017;242:1534-1541
24.	Liu X, Ma C, Wang X, et al. Hydrogen coadministration slows the development of COPD-like lung disease in a cigarette smoke-induced rat model. Int J Chron Obstruct Pulmon Dis. 2017;12:1309-1324
25.	Suzuki Y, Sato T, Sugimoto M, et al. Hydrogen-rich pure water prevents cigarette smoke-induced pulmonary emphysema in SMP30 knockout mice. Biochem Biophys Res Commun. 2017;492:74-81
26.	Gao Y, Yang H, Fan Y, Li L, Fang J, Yang W. Hydrogen-rich saline attenuates cardiac and hepatic injury in doxorubicin rat model by inhibiting inflammation and apoptosis. Mediators Inflamm. 2016;2016:1320365
27.	Lu S, Chen Z, Hu C, et al. Nedaplatin plus Docetaxel versus Cisplatin plus Docetaxel as first-line chemotherapy for advanced squamous cell carcinoma of the lung – a multicenter, open-label, randomized, phase III trial. J Thorac Oncol. 2018;13:1743-1749
28.	Choi YW, Jeon SY, Jeong GS, et al. EGFR exon 19 deletion is associated with favorable overall survival after first-line gefitinib therapy in advanced non-small cell lung cancer patients. Am J Clin Oncol. 2018;41:385-390
29.	Reck M. Pembrolizumab as first-line therapy for metastatic non-small-cell lung cancer. Immunotherapy. 2018;10:93-105
30.	Liou GY, Storz P. Reactive oxygen species in cancer. Free Radical Res. 2010;44:479-496
31.	Cui Q, Wang JQ, Assaraf YG, et al. Modulating ROS to overcome multidrug resistance in cancer. Drug Resist Updat. 2018;41:1-25
32.	Fukuda KI, Asoh S, Ishikawa M, Yamamoto Y, Ohsawa I, Ohta S. Inhalation of hydrogen gas suppresses hepatic injury caused by ischemia/reperfusion through reducing oxidative stress. Biochem Biophys Res Commun. 2007;361:670-674
33.	Tan YC, Xie F, Zhang HL, et al. Hydrogen-rich saline attenuates postoperative liver failure after major hepatectomy in rats. Clin Res Hepatol Gastroenterol. 2014;38:337-345
34.	Liu Y, Yang L, Tao K, et al. Protective effects of hydrogen enriched saline on liver ischemia reperfusion injury by reducing oxidative stress and HMGB1 release. BMC Gastroenterol. 2014;14:12
35.	Zhou P, Lin B, Wang P, et al. The healing effect of hydrogen-rich water on acute radiation-induced skin injury in rats. J Radiat Res. 2019;60:17-22
36.	Zheng X, Mao Y, Cai J, et al. Hydrogen-rich saline protects against intestinal ischemia/reperfusion injury in rats. Free Radic Res. 2009;43:478-484
37.	Chen H, Sun YP, Hu PF, et al. The effects of hydrogen-rich saline on the contractile and structural changes of intestine induced by ischemia-reperfusion in rats. J Surg Res. 2011;167:316-322
38.	Shigeta T, Sakamoto S, Li XK, et al. Luminal injection of hydrogen-rich solution attenuates intestinal ischemia-reperfusion injury in rats. Transplantation. 2015;99:500-507
39.	Liu X, Chen Z, Mao N, Xie Y. The protective of hydrogen on stress-induced gastric ulceration. Int Immunopharmacol. 2012;13:197-203
40.	Zhang JY, Wu QF, Wan Y, et al. Protective role of hydrogen-rich water on aspirin-induced gastric mucosal damage in rats. World J Gastroenterol. 2014;20:1614-1622
41.	Kasuyama K, Tomofuji T, Ekuni D, et al. Hydrogen-rich water attenuates experimental periodontitis in a rat model. J Clin Periodontol. 2011;38:1085-1090
42.	Yoneda T, Tomofuji T, Kunitomo M, et al. Preventive effects of drinking hydrogen-rich water on gingival oxidative stress and alveolar bone resorption in rats fed a high-fat diet. Nutrients. 2017;9:64
43.	Zhao S, Mei K, Qian L, et al. Therapeutic effects of hydrogen-rich solution on aplastic anemia in vivo. Cell Physiol Biochem. 2013;32:549-560
44.	Takeuchi S, Wada K, Nagatani K, Osada H, Otani N, Nawashiro H. Hydrogen may inhibit collagen-induced platelet aggregation: an ex vivo and in vivo study. Intern Med. 2012;51:1309-1313
45.	McCarty MF. Potential ghrelin-mediated benefits and risks of hydrogen water. Med Hypotheses. 2015;84:350-355
46.	Manaenko A, Lekic T, Ma Q, Zhang JH, Tang J. Hydrogen inhalation ameliorated mast cell-mediated brain injury after intracerebral hemorrhage in mice. Crit Care Med. 2013;41:1266-1275
47.	Shao A, Wu H, Hong Y, et al. Hydrogen-rich saline attenuated subarachnoid hemorrhage-induced early brain injury in rats by suppressing inflammatory response: possible involvement of NF-kappaB pathway and NLRP3 inflammasome. Mol Neurobiol. 2016;53:3462-3476
48.	Zhuang Z, Sun XJ, Zhang X, et al. Nuclear factor-κB/Bcl-XL pathway is involved in the protective effect of hydrogen-rich saline on the brain following experimental subarachnoid hemorrhage in rabbits. J Neurosci Res. 2013;91:1599-1608
49.	Fu Y, Ito M, Fujita Y, et al. Molecular hydrogen is protective against 6-hydroxydopamine-induced nigrostriatal degeneration in a rat model of Parkinson’s disease. Neurosci Lett. 2009;453:81-85
50.	Fujita K, Seike T, Yutsudo N, et al. Hydrogen in drinking water reduces dopaminergic neuronal loss in the 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine mouse model of Parkinson’s disease. PLoS One. 2009;4:e7247
51.	Li J, Wang C, Zhang JH, Cai JM, Cao YP, Sun XJ. Hydrogen-rich saline improves memory function in a rat model of amyloid-beta-induced Alzheimer’s disease by reduction of oxidative stress. Brain Res. 2010;1328:152-161
52.	Wang C, Li J, Liu Q, et al. Hydrogen-rich saline reduces oxidative stress and inflammation by inhibit of JNK and NF-kappaB activation in a rat model of amyloid-beta-induced Alzheimer’s disease. Neurosci Lett. 2011;491:127-132
53.	Wang D, Wang L, Zhang Y, Zhao Y, Chen G. Hydrogen gas inhibits lung cancer progression through targeting SMC3. Biomed Pharmacother. 2018;104:788-797
54.	Zhang JY, Liu C, Zhou L, et al. A review of hydrogen as a new medical therapy. Hepatogastroenterology. 2012;59:1026-1032
55.	Ohta S. Recent progress toward hydrogen medicine: potential of molecular hydrogen for preventive and therapeutic applications. Curr Pharm Des. 2011;17:2241-2252
56.	Dixon BJ, Tang J, Zhang JH. The evolution of molecular hydrogen: a noteworthy potential therapy with clinical significance. Med Gas Res. 2013;3:10.